大鲵(Andrias davidinus)俗称娃娃鱼,是当今世界上最大的珍稀两栖动物。对此,我国政府历来十分重视,早在1959年就在《野生动物资源保护条例》中明确规定大鲵为国家二类保护动物。在进行大鲵人工繁殖工作中,亲本的成熟状况的掌握是一个关键环节。鉴于大鲵生殖系统的结构特点,不能通过挖卵等方法来检验其性腺发育的进程。目前检验大鲵性成熟状况仅凭借外观检查,不能准确地反映大鲵个体的真实情况,本文采用彩色多谱勒仪,通过测定雌鲵卵巢内卵径的大小,旨在探索检测大鲵成熟状况的有效方法。 1 材料和方法 1.1 试验在四川省崇州市生力养殖场进行,雌鲵为该场自行培育。1.2 测定不同时期的卵径采取整池大鲵进行测量。2000~2002年连续三年催产时分别随机挑选20、30、40尾雌性大鲵通过彩色多谱勒仪测定其卵径大小,然后按照卵径大小的不同,把大鲵分池饲养进行催产。1.3 产卵水温19.5~23.5℃,孵化水温18.~19.5℃。从每个试验组雌鲵所产的卵中随机抽取100枚卵做受精试验,跟踪观察这些卵的受精、孵化以及最后的出苗情况。测量数据取平均值。仪器分辨率0.1mm,扫描频率19Hz 。 2结果与分析 2.1 4月初经过仪器扫描可见卵巢轮廓,绝大多数个体不能分辨卵粒,少数个体的卵径接近2.0mm 。二个月后,即6月10日,测得雌鲵的卵径为2.8~3.2mm,平均3.0mm,此期间卵径平均每周增长0..3mm。在7月10日测得雌蜕卵径为3.9~4.5mm,平均4.2mm,同时还测得最大卵径为5.5mm,此期间卵径平均每周增大0.30mm。 2.2 雌鲵的卵径产前扫描测量值与其产后实测值的关系见表2、图1,经统计分折发现二者之间呈显著的直线相关,相关方程式为Y=0.69x十3.09(n=56,r=-0.9984),Y代表实测值,x代表产前扫描值。 2.3 曾经在2000年6月10日测量结束后,把测得卵径最大的(卵径3.2mm左右)4尾雌蜕进行催产,其结果只有一尾获产,产卵数不足100粒,卵粒偏小,质量比较差。从表3的催产试验看,催产率达到63.6%~68.0%,且卵色泽光亮,弹性好,由此说明大鲵产卵群体的产卵高峰为7月中下旬。 2.4 经过连续三年对卵径处在3.9~4.5mm范围内的大鲵的催产试验(表3),发现极少数个体在通过彩色多谱勒仪测定时其卵巢内只有少量几粒大卵,这些雌鲵注射药物后,或不产卵,或者产空泡零星夹带几粒卵。测定时发现卵巢内大卵比较多雌鲵全产。催产率63.6%~68%、受精率80%~90%,最高可达98%。这些均说明当卵径到达3.9~4.5mm时,雌鲵群体进入产卵高峰,此时应为最佳的催产时机。 2.5 对卵径在3.2~3.8mm这个范围内的雌鲵的催产,在催产时间上应该有所调整。从2000年的催产试验看,催产率、受精率均比较低可以说明这一点。2001年,把催产时间往后推迟一周,按照卵径平均每周的增长幅度0.30mm计算,估算出卵径会到达3.5~4.2mm。而催产率只有33.3%、受精率50%,说明此时还有一部分雌鲵还没有成熟,催产时间还要往后推迟。2002年把催产时间往后推迟二周,估计卵径可以到达3.8~4.5mm,同大多数雌鲵(卵径3.9~4.5mm)成熟程度到达一致。催产试验的催产率、受精率分别为63.5%、79%,与催产最佳时机的催产结果相当接近。 2.6 对卵径在4.6~5.0mm或者以上的雌鲵进行人工催产,催产率比较低,且卵粒混浊,弹性极差。2000年没有一尾产卵;2001年的催产率最高只有33.3%;受精率最高的也只有20%~2002年比2001年的催产效果还要差。这说明对卵径在4.5~5.0mm或以上的大鳃最好不要进行人工催产,否则会造成产后亲本死亡。 3讨论与小结 3.1 进人大鲵的产卵季节,雌鲵卵径的产前扫描测量值与产后实测值相差Y=0.69x十3.09,(n=56,r=-0.9984,Y代表产后实测值,x代表产前扫描值),这可能与测量时观察的角度以及被测卵所处的位置有关。 3.2 越接近产卵季节,性腺的发育越快。这可能与大鲵在这一时期,随着水温的升高,摄食量的增加大部分营养用于性腺发育有关。因此加强产前强化培育可以加快大鲵性腺发育的速度,为大规模的繁育苗种提供亲本保障。 3.3 大鲵的产卵季节在7月中旬至8月初,并且7月中下旬为大鲵的产卵高峰,此时水温达到19.5~23.5℃,雌鲵卵径达到3.9~4.5mm时,为最理想的催产时机。连续三年的催产试验证明,此时期进行人工催产,催产率可以达到63.6%~68%。受精率也比较高,达到80%~90%,最高可达98%。 3.4 由于存在着个体之间的差异,虽然进入产卵季节,也有一部分雌鲵的卵径只有3.2~28mm,甚至还有一部分达到4.6~5.0mm或超过此范围。对于卵径偏小的雌鲵,应该把催产时间往后推迟一至二周。对于卵径偏大的雌鲵,因为催产率、受精率都比较低,可能此时期的卵巢正处于过熟或退化吸收阶段,不能进行人工催产,避免产后亲本大量死亡。 通过彩色多谱勒仪可以测定怀卵大鲵卵巢内卵径的大小,是在催产前对雌性大鲵进行体外检测的行之有效的方法。对选择最佳的催产时间有很大的帮助,可以大大提高人工繁殖过程中的催产率、受精率,为大鲵的大规模苗种生产奠定坚实的基础。 |